amplif kw nukl rodzaje pcr i nie ...amplif kw nukl rodzaje pcr i nie tylko, UG-GUMed, UG GUMed, inne giełdy, MWB rok I, MWB Sem I MSU
[ Pobierz całość w formacie PDF ]
//-->Metody amplifikacji kwasów Metody amplifikacji kwasównukleinowychdr hab. Beata Krawczykdr hab Beata KrawczykKatedra Mikrobiologii PGPublikacja współfinansowana ze środków Unii Europejskiej Publikacja współfinansowana ze środków Unii Europejskiej jpp jjw ramach Europejskiego Funduszu SpołecznegoAmplifikacjamatrycy•PCR‐Polymerase Chain Reaction‐ Łańcuchowareakcjapolimerazy;•Amplifikacja oparta o transkrypcję (NASBA‐Nucleic Acid pj pyp ję (Sequence‐Based Amplification, TAS‐Transcription‐based Amplification System, 3SR‐Self‐sustained sequence Replication, TMA Transcription Mediated Replication,TMA‐Transcription‐MediatedAmplification);•SDA‐Strand Displacement Amplification‐Amplifikacja przemieszczającej się nici, MDA Multiple Displacementprzemieszczającej się niciMDA‐Multiple DisplacementAmplification•LCR– Ligase Chain Reaction‐ Łańcuchowareakcja ligazy•QBR‐Q‐beta replikacjaAmplifikacja sondyAmplifikacja sygnału•MetodabDNA Hybrid CaptureMetoda bDNA, HybridAmplifikacja matrycyA lifik jtPCR(g(ang. Polymerase Chain Reaction)y)Łańcuchowa reakcja polimerazy to reakcja „in j pyj„vitro”, która naśladuje reakcję replikacji DNA w komórkachSłuży do selektywnej amplifikacji yyjpj(namnożenia) wybranego fragmentu DNA „in vitro” w gmilionowych ilościach jego kopii w przeciągu kilku godzin pąggProfil temperaturowo‐czasowy reakcji PCR. Każdy cykl złożony z 3 Profil temperaturowo‐czasowy reakcji PCR. Każdy cykl złożony z 3 etapów: denaturacji (D), przyłączania starterów (A) i syntezy DNA (S).etapów: denaturacji (D) przyłączania starterów (A) i syntezy DNA (S)PoczątkowadenaturacjaCykl 1 Cykl 2 Cykl 3yyyDDDitd.94Teemperaturaa (C°)72S SS 55AA20czasTeoretycznie po n cyklach otrzymuje się 2 do potęgi n, dwuniciowych cząsteczek DNA, czyli ich ilośćwzrasta logarytmicznie. Wszystkie one pg yypowinny być wiernymi kopiami sekwencji oskrzydlanej py yypjyj przezstartery. Cykli w zasadzie przeprowadza się od 20 - 40. Zatem z jednej matrycy DNA po 20 cyklachuzyskuje się amplifikację rzędu około 1 048 576, a po 30 cyklach rzędu 1 073 741 824. [ Pobierz całość w formacie PDF ] |
Podobne
|